【PDF】蛋白質純化與鑒定實驗指南-朱厚礎 主譯 - 醫(yī)學資源下載
2013-07-30 05:00
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上傳日期:2012-11-18 14:46:15
【pdf】蛋白質純化與鑒定實驗指南-朱厚礎 主譯
【圖書簡介】
為適應生命科學發(fā)展的需要,自1989年以來,著名的美國冷泉港實驗室每年舉辦一期"蛋白質純化與鑒定研習班",本書即是在其講稿的基礎上形成的。全書分4個單元,分別以鈣調蛋白、轉錄因子AP-1、重組和******受體為例,從不同的原材料出發(fā),通過一組具有代表性的并經多年優(yōu)化的純化和鑒定實驗,具體地介紹現(xiàn)代生物學和醫(yī)學實驗室中一系列常用的蛋白質純化與鑒定技術;對每個實驗均詳細敘述其材料設備、試劑配制、操作程序和注意事項等。書后附錄對若干重要的通用技術作了補充介紹。
本書可供分子生物學、細胞生物學、微生物學、生物化學、遺傳學,以及醫(yī)學、農學等領域的科研和教學人員參考,是實驗室的必備工具書。
【圖書目錄】
序
前言
緒論
如何使用本指南
第1單元 鈣調蛋白的純化
實驗1 活性測定:鈣調蛋白組分的活性測定
實驗2 組織提取物的制備
實驗3 粗分級分離
實驗4 離子交換層析
實驗5 疏水作用層析
實驗6 鈣調蛋白的鑒定:收率的計算
實驗7 鈣調蛋白的鑒定:電泳
實驗8 蛋白質的裂解消化
實驗9 反相高效液相色譜
實驗10 鈣調蛋白的物理分析
實驗11 鈣調蛋白的化學分析
試劑的配制
第2單元 Hela細胞轉錄因子AP-1的純化
實驗1 Hela細胞核提取物的制備
實驗2 Sephacry S-300 HR凝膠過濾層析
實驗3 序列特異性DNA親和層析
實驗4 DNA酶I足跡分析
實驗5 凝膠遷移變動分析
實驗6 肝素-Sepharose CL-2B的制備
試劑的配制
參考文獻
第3單元 大腸桿菌中過表達重組蛋白的純化
實驗1 大腸桿菌細胞的破碎和包涵體的配制
實驗2 包涵體沉淀的溶解、重折疊和離子交換層析
實驗3 可溶性提取物的聚乙烯亞胺沉淀和免疫親和層析
實驗4 定量測定與制備小結
實驗5 蛋白質的鑒定
方案補充實驗:從過表達細菌提純
試劑的配制
參考文獻
第4單元 鼠肝******受體的溶解與純化
實驗1 大鼠肝臟質膜的分離
實驗2 膜******受體的溶解
實驗3 溶解受體的凝集素親和層析
實驗4 部分純化受體的******親和層析
實驗5 ******受體與******的交聯(lián)
實驗6 ******激素的******受體自磷酸化
實驗7 ******受體糖基化的分析
試劑的配制
參考文獻
附錄
附錄1 pH的測量
附錄2 緩沖液的配制
附錄3 電導率的測量
附錄4 固態(tài)硫酸銨法分級分離
附錄5 蛋白質的SDS-PAGE電泳
附錄6 蛋白質的過甲酸氧化
附錄7 用亞氨基二乙酸Sepharose 6B分離磷酸肽
附錄8 蛋白質內序分析用肽段的分離與純化
附錄9 推薦讀物
技術索引
主題索引
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